放射性同位素發(fā)出的射線與物質(zhì)相互作用，會直接或間接地產(chǎn)生電離和激發(fā)等效應，利用這些效應，可以探測放射性的存在、放射性同位素的性質(zhì)和強度。用來記錄各種射線的數(shù)目，測量射線強度，分析射線能量的儀器統(tǒng)稱為探測器(probe)。測量射線有各種不同的儀器和方法，正如麥凱在1953年所說：“每當物理學家觀察到一種由原子粒子引起的新效應，他都試圖利用這種新效應制成一種探測器”。一般將探測器分為兩大類，一是“徑跡型”探測器，如照像乳膠、云室、氣泡室、火花室、電介質(zhì)粒子探測器和光色探測器等，它們主要用于高能粒子物理研究領域。二是“信號型”探測器，包括電離計數(shù)器，正比計數(shù)器，蓋革計數(shù)管，閃爍計數(shù)器，半導體計數(shù)器和契倫科夫計數(shù)器等，這些信號型探測器在低能核物理、輻射化學、生物學、生物化學和分子生物學以及地質(zhì)學等領域越來越得到廣泛地應用，尤其是閃爍計數(shù)器是生物化學和分子生物學研究中的必備儀器之一。

　　一、閃爍型探測器

　　1.探測原理

　　閃爍型探測器由閃爍體，光電倍增管，電源和放大器-分析器-定標器系統(tǒng)組成，現(xiàn)代閃爍探測器往往配備有計算機系統(tǒng)來處理測量結(jié)果。當射線通過閃爍體時，閃爍體被射線電離、激發(fā)，并發(fā)出一定波長的光，這些光子射到光電倍增管的光陰極上發(fā)生光電效應而釋放出電子，電子流經(jīng)電倍增管多級陰極線路逐級放大后或為電脈沖，輸入電子線路部分，而后由定標器記錄下來。光陰極產(chǎn)生的電子數(shù)量與照射到它上面的光子數(shù)量成正比例，即放射性同位素的量越多，在閃爍體上引起閃光次數(shù)就越多，從而儀器記錄的脈沖次數(shù)就越多。測量的結(jié)果可用計數(shù)率，即射線每分鐘的計數(shù)次數(shù)(簡寫為cpm)表示，現(xiàn)代計數(shù)裝置通�？梢酝瑫r給出衰變率，即射線每分鐘的衰變次數(shù)(簡寫dpm)、計數(shù)效率(E)、測量誤差等數(shù)據(jù)，閃爍探測器是近幾年來發(fā)展較快，應用最廣泛的核探測器，它的核心結(jié)構(gòu)之一是閃爍體。閃爍體在很大程度上決定了一臺計數(shù)器的質(zhì)量。

　　2.閃爍體

　　閃爍體是一類能吸收能量，并能在大約一微秒或更短的時間內(nèi)把所吸收的一部分能量以光的形式再發(fā)射出來的物質(zhì)。閃爍體分為無機閃爍體和有機閃爍體兩大類，閃爍體必需具備的性能是：對自身發(fā)射的光子應是高度透明的。閃爍體吸收它自己發(fā)射的一部分光子所占的比例隨閃爍材料而變化。無機閃爍體[如Nal(Tl),ZnS(Ag)]幾乎是100%透明的，有機閃爍體(如蒽，塑料閃爍體，液體閃爍體)一般來說透明性較差。現(xiàn)在常使用的幾種閃爍體是：⑴無機晶體，主要是含雜質(zhì)或不含雜質(zhì)的堿金屬碘化物;⑵有機晶體，在都是未取代的或取代的芳香碳氫化合物;⑶液態(tài)的有機溶液，即液體閃爍體;⑷塑料溶液中的有機溶液，即固溶閃爍體。

　　3.光電倍增管

　　它是閃爍探測器的最重要部件之一。其組成成份是光陰極和倍增電極，光陰極的作用是將閃爍體的光信號轉(zhuǎn)換成電信號，倍增電極則充當一個放大倍數(shù)大于106的放大器，光陰極上產(chǎn)生的電子經(jīng)加速作用飛到倍增電極上，每個倍增電極上均發(fā)生電子的倍增現(xiàn)象，倍增極的培增系數(shù)與所加電壓成正比例，所以光電倍增管的供電電源必須非常穩(wěn)定，保證倍增系數(shù)的變化最小，在沒有入射的射線時，光電倍增管自身由于熱發(fā)射而產(chǎn)生的電子倍增稱為暗電流。用光電倍增管探測低能核輻射時，必須減小暗電流。保持測量空間環(huán)境內(nèi)較低的室溫，是減小光電倍培管暗電流的有效方法。

　　二、晶體閃爍計數(shù)(crystal scintillation counting)

　　1.探測原理

　　γ射線不同于α和β粒子，它類似于光和其它電磁輻射，在與物質(zhì)作用時不直接產(chǎn)生電離，而是按下述三種機制之一被吸收：光電效應，康譜頓效應和生成電子對。在光電效應中，每個光子將保持它的全部能量直到與吸收物質(zhì)內(nèi)原子的一個軌道電子相互作用為止。在此過程中，光子把全部能量給予電子，電子以高速度射出，光子就不再存在，發(fā)射出的電子稱為光電子，光電子按β粒子同樣的方式，將其能量電離，其它原子則消耗掉。在康普頓效應中，能量為hv的入射γ光子，與吸收物質(zhì)內(nèi)原子的一個軌道電子相互作用。在該過程中，光子把它的能量給予軌道電子，使電子射出，隨后帶有較小能量hv’’的光子按能量和動量兩者都守恒的形式被“散射”。射出的電子稱為反沖電子，又叫康普頓電子。康普頓電子象光電效應中的情況一樣，按與β粒子相同的方式消散它的能量，散射光子進一步通過光電或康普頓過程被吸收。電子對生成時，某些入射光子能量按照愛因斯坦方程轉(zhuǎn)化為質(zhì)量：E=mc2 式中E為er(樂格)表示的能量，m為以g表示的質(zhì)量，c為光速，以cm/s為單位，入射的γ光子在吸收物質(zhì)的一個原子的核場中以一種未知的方式湮滅，隨后產(chǎn)生兩個粒子，一個負電子和一個正電子，正電子只存在一個很短的時間，一旦它減慢，它就被吸收物質(zhì)中的一個電子所中和，這一湮滅過程導致一對γ光子的產(chǎn)生，其每一個光子能量為0.51MeV,最終通過光電效應康普頓效應吸收。γ射線由于沒有質(zhì)量，具有很強的穿透性，而且最易被高電子密度的物質(zhì)所吸收，如鉛。具有高原子序數(shù)Z的原子直接與高電子密度有關(guān)。就探測器而言，某些無機鹽能有效地吸收γ光子，發(fā)射出強度正比于所吸收γ射線能量的光子。例如，鉈激活的碘化鈉，由于碘原子的原子序數(shù)Z高，并且有較高的密度(比重3.67)，而且每吸收單位能量的光子產(chǎn)額高，晶體的光透性也好，用來探測γ射線，效率較高。

　　2.探測裝置

　　一個供探測γ光子用的固體晶體裝置包括一個“密閉的”鉈激活碘化鈉晶體，安放在光電倍增管的表面上�！懊荛]的”晶體上是一塊固態(tài)圓筒狀的鉈激活碘化鈉，其頂部和四周都是用鋁層包裹以避免光和濕氣，因為碘化鈉晶體易吸潮，為改善反射性，碘化鈉晶體用一玻璃片密封，并同光電倍增管的表面直接接觸，其間加些硅油以達到光學匹配，整個裝置是不透光的。γ射線易于穿透晶體外表的鋁層，然后被高效的晶體所吸收，晶體發(fā)射出其能量與入射γ射線能量成比例的可見光。接著，光電倍增管將可見光能量轉(zhuǎn)換為電脈沖，各種能量轉(zhuǎn)換過程(即從γ光子發(fā)射直到產(chǎn)生一個電脈沖)成比例的性質(zhì)，以及γ光子的吸收性質(zhì)，保證γ放射性同位素可通過晶體閃爍得以計數(shù)，并定量。晶體γ計數(shù)器通常設計成既能有效地探測光電效應，又能有效地探測康普頓效應。但探測效應隨著光子能量的增大而減小，對于大多數(shù)市售γ計數(shù)器所用碘化鈉晶體的尺寸來說，光電效應在低光子能量，例如在低于400keV時占主要地位，而在1MeV附近即以康普頓效應為主。在這兩種能量之間，兩種效應幾乎以相等的頻率發(fā)生，由于所用的晶體尺寸較小，難以探測到電子對的生成。另外，在塑料溶劑(如聚乙烯甲苯)中加入閃爍體(如POPOP或TP)，做成片狀，可用來探測能量較高的β射線，如32P放出的1.71MeV的高能量β射線。最早使用的硫化鋅晶體較薄，內(nèi)含微量的微量的銀作為激活劑，可用來探測α射線。

　　3.晶體閃爍計數(shù)的定性、定量分析

　　放射性同位素鉻主要按電子俘獲方式衰變，其半衰期為27.8天，由于電子俘獲，原子的原子序數(shù)減少1，因而變成一種釩的同位素，按電子俘獲方式衰變至基態(tài)釩發(fā)生的頻率為91%，并導致隨后發(fā)射-5keV的弱X射線，此X射線一般難以探測，因為從樣品中出來的 X射線在其能穿入碘化鈉晶體之前已被吸收掉了。51Cr有9%的機會通過電子俘獲衰變到釩的一種受激核態(tài)，并立刻通過發(fā)射-320keV的γ射線衰變至穩(wěn)定的基態(tài)，這種γ射線易于探測。用晶體閃爍計數(shù)器來觀察51Cr，在320keV處觀察到一個尖銳的峰，稱為光電峰，這是γ光子能量以光電效應損耗的結(jié)果，但并非所有能量都以此過程損耗，所以在較低能量時光子能量由于康普頓效應損耗而出現(xiàn)一連串較寬不明顯的峰，從光電峰下到谷的對側(cè)稱為康普頓邊緣。能量低于康普頓區(qū)的擴散峰，是由于γ射線對吸收物質(zhì)的反散射引起的，散射光子的能量低。各種γ射線放射性同位素都有其特征的光電峰，利用特征光電峰，可對各種γ射線放射性同位素進行定性和鑒別。對各種樣品的γ射線計數(shù)測量是將測得的計數(shù)率與總放射性強度或標準源的計數(shù)率進行比較，可以算出樣品放射性占總放射性或標準源的百分比，從而獲得樣品放射性強度。

　　4.儀器性能的評價

　　晶體閃爍計數(shù)器現(xiàn)在基本都做成井型或圓柱型，用碘化鈉(鉈)作為閃爍體，探測γ射線，所以又把探測γ射線的晶體閃爍計數(shù)器稱為 γ計數(shù)器(γ-counte-r)。γ計數(shù)器的性能一般是根據(jù)其對137Cs的662keV光電峰的分辯能力而加以比較的，探測系統(tǒng)的分辯率是一光電峰展寬程度的量度，定義為最大峰高的一半處的峰寬度(用keV為單位)除以該光電峰的最大脈沖高度(用keV為單位)再乘以100。如果光電倍增管工作在最佳狀態(tài)時，分辯率能達到7%。但是，通常的井形晶體計數(shù)器由于光學性質(zhì)較差，其分辯率也較差，其分辯率值約為12%。γ射線能量越高，光電峰的分辯率也會有所改善。

　　三、液體閃爍計數(shù)(Liquifd scintillation counting)

　　液體閃爍計數(shù)所用的閃爍體是液態(tài)，即將閃爍體溶解在適當?shù)娜芤褐�，配制成為閃爍液，并將待測放射性物質(zhì)放在閃爍液中進行測量。應用液體閃爍計數(shù)可達到4π立體角的優(yōu)越幾何測量條件，而且源的自吸收也可以忽略，對于能量低，射程短、易被空氣和其它物質(zhì)吸收的α射線和低能β射線(如3H和14C)，有較高的探測效率，液體閃爍計數(shù)器是α射線和低能β射線的首選測量儀器。

　　1.探測機理

　　閃爍液產(chǎn)生光子的過程是，從放射源發(fā)出的射線能理，首先被溶劑分子吸收，使溶劑分子激發(fā)。這種激發(fā)能量在溶劑內(nèi)傳播時，即傳遞給閃爍體(溶質(zhì))，引起閃爍體分子的激發(fā)，當閃爍體分子回到基態(tài)時就發(fā)射出光子，該光子透過透明的閃閃爍液及樣品的瓶壁，被光電倍增管的光陰極接收，繼而產(chǎn)生光電子并通過光電倍增管的倍增管的位增極放大，然后被陽極接收形成電脈沖，完成了放射能→光能→電能的轉(zhuǎn)換。

　　2.閃爍液

　　液體閃爍計數(shù)系統(tǒng)作用的閃爍溶液，是指閃爍瓶中除放射性被測樣品之外的其它組分，主要是有機溶劑和溶質(zhì)(閃爍體)，有時為了樣品的制備或提高計數(shù)效率的需要，還加入其它添加劑。 ⑴溶劑：從β源放射β射線到發(fā)射能被肖陰極接收的光婦的這一系列能量轉(zhuǎn)移環(huán)節(jié)中，能量轉(zhuǎn)移效率是很低的，只有少部分放射能量被利用來發(fā)射光子，其中放射源與溶劑之間，能量轉(zhuǎn)移效率大約為5￣10%。對溶劑的選擇，主要視其對閃爍體的溶介度和將放射能轉(zhuǎn)移給閃爍體的效率而定。如果以一定濃度的閃爍體在甲苯溶液中產(chǎn)生的脈沖高度為100%，那么，凡能產(chǎn)生80%以上的脈沖高度的都定為溶劑，能使脈沖高度隨其濃度上升而逐漸減小的稱為稀釋液，而在濃度很低時就能引起脈沖高度顯著下降的叫淬滅劑。在液體閃爍計數(shù)系統(tǒng)中，一個好的溶劑應滿足下列條件：①對閃爍體的溶介度高;②對放射源的轉(zhuǎn)移效率高;③對閃爍發(fā)射的光子透明度高;④在無論有無助溶劑的幫助下都可以溶介放射性樣品;⑤在計數(shù)器的工作溫度下來結(jié)冰;⑥能夠形成均相的測量溶液。一般認為，烷基苯是最好的溶劑，如甲苯，二甲苯。此外，苯甲醚也是比較好的溶劑。另外，對于含水量較多的樣品，采用1，4-二氧不作為溶劑，因為該有機化合物的極性較大，既能很好地溶介閃爍體又可溶介含水量較多的樣品，能改善計數(shù)效率，缺點是價格昂貴，冰點高，久放后產(chǎn)生淬滅作用很強的過氧化物，必須經(jīng)純化才能使用，并應加入 0.001%的二乙基二硫代氨基甲酸鈉或丁基氫氧基甲苯(BHT)，

　　以抑制純化的二氧六環(huán)變質(zhì)。溶劑在閃爍溶液中約占99%，因此，它的純度對閃爍液的品質(zhì)是很大的影響因素。溶劑中不發(fā)光的雜質(zhì)、氧和水的含量多少，都關(guān)系到淬滅程度。原則上講，溶劑應具有閃爍純，即不含或很少含有影響閃爍計數(shù)的淬滅成分。實際證明，“分析純”試劑可以不經(jīng)純化而直接使用。

　�、崎W爍液：在液體閃爍計數(shù)系統(tǒng)中，閃爍體又稱熒光體，是閃爍液的溶質(zhì)，它的很多，根據(jù)其熒光特性及作用，可分為兩類，即第一閃爍和第二閃爍體。

　�、俚谝婚W爍體：(初級閃爍體)：常用的第一閃爍體：對聯(lián)三苯(TP)：化學結(jié)構(gòu) 它是最早使用的閃爍體之一。它的計數(shù)率高，價格比較便宜，但是，在低溫或含水溶液介度不高。2,5-二苯惡唑(PPO)：化學結(jié)構(gòu) 它是目前普遍使用的閃爍體，能很好地溶介在常用的溶劑中，在含水的情況下也是如此，在甲苯中的溶介度達200克/升以上。它的化學性質(zhì)穩(wěn)定，價格也較便宜。但是，它的最大缺點是有明顯的濃度淬滅(自身淬滅)，即隨著PPO在溶劑中的濃度升高，計數(shù)效率下降。2-苯基-5-(4-二苯基)-1,3,4惡唑(PBD)：化學結(jié)構(gòu)為 它是已知的最有效的閃爍體之一。比PPO能耐受濃度淬滅，但是，它的溶介度低，尤其是在低溫和含水樣品存在時，溶介度下降更快，而且用量比PPO多兩倍，價格昂貴。2-(4-t-丁基苯基)-5-(4-二苯基)-1,3,4,惡二唑(丁基-PBD)：化學結(jié)構(gòu)為 它的溶介度比PBD高，其最大優(yōu)點對化學淬滅和顏色淬滅不敏感，因此，可以獲得較高的計數(shù)效率。 ②第二閃爍體(次級閃爍體)：第二閃爍體的主要功能是吸收第一閃爍體發(fā)射的光子后，再在較長的波段上重新發(fā)射出熒光來，并能增加光子的產(chǎn)額。在高濃度下第二閃爍體起著一部分與第一閃爍體相同的作用(即接受激發(fā)溶劑分子的的退激能量，并發(fā)出熒光)，此外，它還能與淬滅因子競爭，從而減少了第一閃爍被淬滅的程度。在下列一種或一種以上的情況下，必須在閃爍液中加入第二閃爍體：a. 樣品中含有直接淬滅第一閃爍體的化合物;b. 第一閃爍體濃度太高而引起強烈的自身淬滅，且發(fā)射的光譜范圍與光電倍增管光陰及不匹配;c. 計數(shù)器的光電倍增管光陰極對于較長波長的光譜響應比較好;d. 測量的樣品在近紫外區(qū)有明顯的吸收。

　　常用的第二閃爍體有：1,4,雙2(5苯基惡唑)苯(POPOP)它的溶介度小，在甲苯系統(tǒng)為1.2克/升，在二氧六環(huán)中為1.5克/升。溶介速度慢，通常需加熱促其溶介，它是目前普遍使用的第二閃爍體。1,4雙2(4-甲基-5-苯基惡唑基)-苯(DMPOPOP)：它的溶介度比POPOP大，在甲苯系列內(nèi)為2.3克/升，在二氧六環(huán)內(nèi)是0.8克/升，溶介速度也快，但沒有POPOP的計數(shù)效率高，且需要較高的使用濃度。此外，還有對-雙(0-甲基苯乙稀基)苯，(雙-MSB)和2-(4’’-二聯(lián)苯基)-6-苯基苯并惡唑(PBBO)，幾種常用的初級閃爍體的熒光波長在3460-3800埃之間，而Cs-sb型光陰極的最大光譜響應波長為4000埃左右。因此，對于Cs-Sb材料的光陰極，僅用初級閃爍體不能很好地進行能量轉(zhuǎn)移，計數(shù)效率很低，加入次級閃爍體后發(fā)射光譜波長增加到4180-4300埃，使其與Cs-Sb型光陰的光譜響應得到改善，能量轉(zhuǎn)移較好，計數(shù)效率提高。Cs-K-Sb型是雙堿型光電倍增管，它的最大光譜響應波長比Cs-Sb型短。因此，不用次級閃爍體也可以有較好的計數(shù)效率。但是，考慮到次級體和其它功用，通常在實際工作中，往往都要使用次級閃爍體。

　　閃爍液中除了溶劑，閃爍體之外，有時還添加一些其它成分。為了增加閃爍液對含水樣品的溶解能力，需加入助溶劑;為了改善計數(shù)效率，則加入抗淬滅劑。甲苯、二甲苯等有機溶劑極性很小，對水的溶介能力較差。當樣品含水較多時，即使樣品體積不大，也很難和甲苯中二甲苯互溶為透明的均相學府。有時樣品的含水量雖然不大，但它的放射性水平很低，為了在較短的測量時間獲得符合統(tǒng)計誤差要求的計數(shù)往往需要增加樣品的體積，這就等于增加了含水量，這樣的樣品也不能很好地和甲苯或二甲苯互溶，為此，要加入一定量的極性較大的有機溶劑，如甲醇，乙醇，乙二醇乙醚等，這些溶劑在非極性溶劑和水分子之間起著橋梁作用，既能和甲苯、二甲苯互溶，又能和水互溶，達到增加含水樣品在閃爍液內(nèi)的溶解度的目的，所以稱之為助溶劑。\par 助溶劑的淬滅作用較大要限制其用量，因而，可容納的含水量也是有限的。其中乙二醇乙醚的極性大且學淬滅作用小，是常用的助溶劑�？勾銣鐒┩ǔＳ迷趯�含水量很大的樣品測量或采用二氧六環(huán)作溶劑時，因為這種閃爍液淬滅作用大，為改善計數(shù)效率，加入抗淬滅劑萘是十分重要的。萘也是一種熒光物質(zhì)，它可以抵消一部分淬滅作用，但是萘不能和對聯(lián)三苯合用，尤其是在甲苯、二甲苯溶劑中，否則計數(shù)效率很低。液體閃爍計數(shù)器中，閃爍液的最佳體積可以在一定范圍內(nèi)有所變化，吸要能獲得較高的計數(shù)效率，就應該采用較少的體積，尤其對于3H樣品來說，較小體積的閃爍液還可以減少本底計數(shù)(大約0.5cpm/ml閃爍液)，減少樣品的自吸收。如果當樣品中含有淬滅劑成分時，增加閃爍液的體積，可以經(jīng)稀釋作用來減少淬滅。

　　3.探測裝置

　　在液體閃爍計數(shù)中引用非常靈敏的光電倍增管，對于探測穿透力低的α射線和低能量的β射線(如3H，14C等)是極為重要的。使用一個光電倍增管的單光電倍增管液體閃爍計數(shù)器，由于電倍增管的熱噪聲及樣品受光照射后發(fā)出的磷光，會有較高的本底計數(shù)，探測效率也較低。使用兩個性能指標大致相同的光電倍增管，并和符合電路相連接，做成雙管符合型液體閃爍計數(shù)器，符合電路只能通過由兩只倍增管同時產(chǎn)生的信號，因而只有當兩只光電倍增管在符合電路分辯時間內(nèi)同時觀察到的信號才被記錄下來，而由熱噪聲或磷光產(chǎn)生的隨機脈沖則被扣除掉，有效地降低儀器本底，提高了探測效率，系統(tǒng)探測效率可在50%以上。在液體閃爍計數(shù)系統(tǒng)中，光電倍增管陽極形成脈沖電壓的大小，與陽極一次收集的電子數(shù)成線性關(guān)系。在光電倍增管放大倍數(shù)不變的情況下(取決于高壓的穩(wěn)定性)，光陰極產(chǎn)生的光電子越多，最后到達陽極的電子數(shù)也越多，而光電子數(shù)取決于光子數(shù)。在正常情況下，閃爍劑分子釋放的光子數(shù)與放射性同位素衰變時產(chǎn)生的β射線能量成正比關(guān)系。由于放射能在傳遞和能量轉(zhuǎn)換途中，或多或少地要發(fā)生能量消耗，因此，放射能和發(fā)射的光子數(shù)之間近似地成線性關(guān)系。這說明液體閃爍計能夠作能譜研究，以分析不同能量的放射性同位素，達到定性目的。例如，3H、14C

　　雙標記樣品，可通過雙道液體閃爍計數(shù)器同時測定。陽極在單位時間內(nèi)產(chǎn)生脈沖電壓的數(shù)量，與閃爍瓶內(nèi)放射性同位素的多少以及同位素衰變率成線性關(guān)系，與樣品內(nèi)的放射性強度成正比，這是液體閃爍測量的定量基礎。例如，在知道液體閃爍計數(shù)器探測效率的前提下，通過對某種放射性樣品進行測定，可以求得該樣品中的放射性強度為多少微居里或多少貝柯勒爾。

　　4.雙標記同位素測量的應用

　　液體閃爍計數(shù)器特點之一是能作雙同位素分析，配備兩個或三個以上獨立的脈沖高度分析器的多道裝置，并具有脈沖相加和線性門裝置，在每種同位素的最佳計數(shù)條件下同時測量它們，就能區(qū)分發(fā)射不同能量的同位素，假定有一個含有3H和14C的樣品，我們將儀器中脈沖高度分析器多道裝置中的道1調(diào)3H的平衡點(最佳工作條件)，道2調(diào)在14c的平衡點。3H和14C標準樣品溶解的在同樣的溶劑中，并采用與實驗樣品相同的閃爍體，首先測量空白樣品，然后對實驗樣品和標準樣品進行計數(shù)。

　　為了使雙標記測量獲得成功，兩種放射性同位素的β譜必須要有足夠的差異來滿足脈沖高度分析所要求的分離。在兩種同位素能譜過于接近的情況下，例如14C和35S，必須首先對它們進行同位素的化學分離，然后再分別計數(shù)。在雙標記測量中，較常用的成對同位素有3H和14C、3H和35S、3H和32P及14C和32P等。總之，在雙同位素標記的測量中，要滿足下述兩個條件：第一，較高能量的同位素盡量能夠在不受較低能量同位素干擾的條件下進行計數(shù);第二，選擇一個最佳條件，以對雙標記樣品中較低能量的同位素能進行計數(shù)。

　　5.液體閃爍計數(shù)樣品的制備

　　流體閃爍測量的櫚制備是很重要的操作，操作的成功與否，直接影響到計數(shù)效率。樣品制備方法的選擇要考慮以下四個因素：⑴所測樣品的物理和化學特性，決定所用閃爍液類型和決定是否需要將樣品轉(zhuǎn)化為更適于測量的形式;⑵樣品所含的同位素的種類，對于含3H的樣品要更加注意;⑶預計的放射性水平，在樣品的放射性強度低時，要求的制備方法比較嚴格;⑷制備過程的經(jīng)濟和方便，尤其在樣品數(shù)量多的更為重要。其一般原則是必須使所制備的樣品的放射性，能在一個短的測量時間達到適當?shù)慕y(tǒng)計學準度，最關(guān)鍵的是要求樣品制備過程中，盡可能地減少“淬滅”因素。

　�、啪�相樣品的制備

　　脂溶性樣品可直接加入甲苯、二甲苯系統(tǒng)的閃爍液，含水量小于3%的樣品，仍應用甲苯、二甲苯系統(tǒng)的閃爍液，但需加入乙醇或甲醇或乙二醇乙醚等極性溶劑助溶，助溶劑與甲苯的比例通常為3:7。必需時加抵消部分淬滅作用，提高計數(shù)效率，含水量再大時，最好采用100毫升乙二醇乙醚。20毫升乙二醇，8克PPO,500毫克POPOP，150克萘，最后用二氧六環(huán)加到1升的閃爍液配方，此配方容納水量大，效率好相當高，但需注意二氧六環(huán)易形成過氧化物，會導致化學發(fā)光的進行，所以應在避光條件下貯存，或者在貯存期間加入鋅�；蚱渌�抗氧化劑以清除過氧化物。

　�、品蔷�相樣品的制備

　　①乳狀液計數(shù)：表面活化合物Triton X-100是廣泛應用的乳化劑，其化學結(jié)構(gòu)式： 它的親水端吸引水和其它極性分子，疏水端吸引甲苯等非極性分子。乳狀液的物理性能隨著水分的增加而改變。當甲苯閃爍液與Triton X-100按2:1(v/v)組成的配方時，樣品水分在15%以下的乳狀液是透明的;隨著水分的增加，就會出現(xiàn)兩個不同的相，分相的乳狀液不穩(wěn)定，不能用于測量;水分繼續(xù)增加，就形成穩(wěn)定的乳狀液，此時液體是透明的或不透明的。乳狀液的分相與溫度有關(guān)，在溫度由17℃開始下降時，計數(shù)效率線性地增加約10%，到4-0℃之間為最大值，溫度再低，計數(shù)效率不再增加，通常把乳狀液首先加熱到40℃，然后在無振蕩的情況下冷卻，在4℃保持2-4小時。溶質(zhì)在有機相和水相之間的不同分布是決定乳狀測量計數(shù)效率的關(guān)鍵，乳狀液測量的效率有時會比均相測量更高，這是因為淬滅物質(zhì)主要保留在水相中而不影響在有機相中發(fā)生的能量轉(zhuǎn)移過程。在均相溶液中，系統(tǒng)中所有的成人的成份都密切地相互接觸，所以任何一個淬滅作用都能表現(xiàn)出來。

　�、趹腋∫簻y量：對于在甲苯等為基礎的閃爍液中溶解度極低的無機鹽等樣品，可采用凝膠技術(shù)成懸浮測量液。樣品經(jīng)初步處理后，制成相同大小的顆粒，然后在含有凝膠劑的系統(tǒng)中做成懸浮液。對于懸浮液測量，下列要求是必須的：①固體物質(zhì)要很好地粉碎，并要求是白色或無色的均勻粉狀顆粒，以避免光的吸收;②要求樣品確實不溶于閃爍液，否則溶解的與不溶解的部分有不同的計數(shù)效率，造成計數(shù)不穩(wěn)定，結(jié)果不易重復。懸浮液測量的優(yōu)點是樣品不溶解在溶劑中，所以樣品淬滅極小。在懸浮測量中作為聚膠劑的物質(zhì)有硬脂酸鋁、蓖麻油的衍生物(thixin)

　　及二氧化硅的細顆粒(Cab-o-sil)。含3.5￣4.0% Cab-o-sil的懸浮液，要以得到很高計數(shù)效率，Cab-o-sil還可以減少計數(shù)瓶壁對放射性吸附作用，一般制樣時，往往先加Cab-o-sil，再加入放射性樣品，使放射性更多地吸附在懸浮顆粒上而提高計數(shù)效率。懸浮液測量法除應用于固體無機鹽的測定外，也可用于水溶液和組織勻漿，還可用來測量薄層層析的放射性，應用時只要將層析物粉碎，簡單地與凝膠混合即可，如果待測物能部分地從層析支持物上被洗脫而溶于閃爍液，則此法不可使用。

　�、壑С治餃y量：與懸浮液測量相似，凡不溶于閃爍液的樣品，可將它放置在支持物上再浸入閃爍液中進行計數(shù)。支持物的種類很多，如紙條、濾紙、玻璃纖維濾紙及醋酸纖維素膜片等。支持物在計數(shù)瓶內(nèi)的位置對計數(shù)有直接影響，通常都采用平放瓶底測量，且膜片不超出閃爍液面，保持支持物和測量杯的干燥，都能獲得較高的計數(shù)效率和測量重復性。支持物測量除淬滅作用小外，還有一個突出的優(yōu)越性，即一次測量可以黨綱較多的樣品。因在同一測量瓶內(nèi)，隨膜片疊加數(shù)目的增加(10片之內(nèi))，計數(shù)率線性增加而計數(shù)效率保持不變，這對于放射性水平低的含水樣品測量非常適用。\par 在上述幾種支持物中，以醋酸纖維素薄膜、玻璃纖維濾紙的效果優(yōu)于普通濾紙，因為普通濾紙對光子傳播幾乎是不透明的，所以計數(shù)效率很低。

　　6.液體閃爍計數(shù)中的淬滅作用

　　放射能量在測量瓶內(nèi)的傳遞和轉(zhuǎn)換過程越順利，測量效率越高。但事實上，影響能量傳遞過程順序進行的因素很多，它的每一環(huán)節(jié)都存在著對能量的爭奪過程，使得放射能減少，甚至發(fā)生能量傳遞的中斷，導致測量效率下降，這種現(xiàn)象稱為液體閃爍計數(shù)的淬滅。造成淬滅的因素很多，按淬滅性質(zhì)歸納起來，有下列三種類型。

　�、呕瘜W淬滅

　　化學淬滅的產(chǎn)生，是由于被放射能激發(fā)的少量溶劑分子在分子運動中，與非激發(fā)的雜質(zhì)、溶劑、溶質(zhì)分子碰撞而將激發(fā)能發(fā)熱能形式消耗�；瘜W淬滅的嚴重程度取決于淬滅物質(zhì)的化學結(jié)構(gòu)和濃度�；瘜W淬滅與淬滅物濃度的關(guān)系是淬滅物質(zhì)的濃度越大，淬滅作用越嚴重。例如，氧和水都是強淬滅劑，在常溫壓下，閃爍液都能溶介空氣中的氧，當氧的溶解量達到2×10-3M時，淬滅作用比無氧情況下大20%，而且閃爍液中的含水量(來自含水樣品和溶劑中的少量水分以及其它的添加劑)在可能的條件下，應越少越好，閃爍液不能放在冰箱中。

　　⑵顏色淬滅

　　由于顏色對光量子的吸收作用，使得帶顏色的閃爍液削弱了光子的亮度，也縮短了光量子的自由程，導致到達光陰極的光子數(shù)減少，造成計數(shù)效率下降。不同的顏色，淬滅作用程度不同，閃爍液熒光波長接近于紫外光，所以，顏色淬滅程度的順序為：蘭色〉黃色〉紅色。一些生物樣品，如血、尿等在制樣過程中，要進行脫色處理，如果支持物測量中，濾膜干燥時被烤黃，也會造成計數(shù)效率的嚴重下降。

　�、枪庾哟銣�(又稱局部淬滅)

　　在非均相測量中，由于樣品本身的自吸收而使β射線能量在沒有傳遞給溶劑分子之前就消耗掉了，這種淬滅在均相測定中，因樣品處理不好，也會發(fā)生，謂之光子淬滅。前已述及，不同能量的放射性核素，在液體閃爍計數(shù)時，閃爍體給出的光子數(shù)不同，產(chǎn)生的電脈沖高度亦不同。如果由接近平均能量的14C1的β粒子產(chǎn)生400個光子，在一個符合型液體閃爍器中，每個光電倍管將接收200個光子，又因為光電倍增管的最子效率大約是25%，因此200個光子打到光陰極上產(chǎn)生大約50個光子，而淬滅作用使得到達光陰極光子數(shù)減少，這種減少只要能讓每次衰變記錄下來，否則就被計數(shù)器漏記，因此，將這些考慮應用到能量較低的3H時，如果按平均能量(0.018MeV)計算，3H的β粒子在甲苯閃爍液中，大約產(chǎn)生40個光子，按25%的量子效率計算，則每個光電倍增管光陰極大約產(chǎn)生5個光子，與14C相比，光電子產(chǎn)額為1:10，所以，在3H測定中，中等程度的淬滅就會產(chǎn)生不能挽回的計數(shù)損失。

　　四、放射測量的注意事項

　　在放射測量過程中，以下幾個問題不應忽視：

　　1.任何測量放射性的計數(shù)方法都存在本底問題。所謂本底指被測樣品之外的信號輸出。因此，在測量到的樣品計數(shù)率中，要扣除本底計數(shù)率，才能獲得樣品的凈計數(shù)率，儀器本底越低，測量靈敏度越高，準確度也越高，這在3H標記物的低水平測量中尤為重要。

　　2.在放射性測量工作中，通常存在著三種誤差：①系統(tǒng)誤差;由于測量儀器本身或測量方法和程度的不合理以及周圍環(huán)境的影響因素，使測量結(jié)果單向偏離而造成的誤差。系統(tǒng)誤差產(chǎn)生的原因可以找到并能加以克服;②過失誤差，由于實驗工作者的主觀錯誤造成，是一種無規(guī)律可循的誤差，但過失誤差也是可以避免的;⑶統(tǒng)計誤差，由于放射性衰變本身的隨機性而導致的無法控制的誤差，它是放射性測量誤差中主要的、固有的來源。對于放射性測量統(tǒng)計誤差，在實際工作中，常通過提高計數(shù)效率，增加測量次數(shù)(以3￣5次為宜)或每個樣品做1￣2個平行管計數(shù)、合理分配測量時間等方法，以獲得最小的測量誤差。

　　3.在液體閃爍計數(shù)測量中，樣品中含有的水份、混入的雜質(zhì)或帶有的等許多因素，都會使得放射能減少，甚至發(fā)生能量傳遞的中斷，而導致計數(shù)效率下降，即“淬滅”。在樣品制備過程中，應避免引起淬滅的因素，如果欲知櫚的真正放射量，并進行樣品間的相互比較，就需作淬滅校正，將cpm值換算成dpm值。常用的淬滅校正方法有稀釋法、內(nèi)標準法、道比法、外標準道比法等等。但是最為關(guān)鍵是在樣品和測量過程中,盡可能地將淬滅因素減低到最小的程度.

　　常用同位素理化性質(zhì)，檢測方法

　　單位換算

　　Curies 和 d . p . m 的換算.

　　1 Curie (Ci) =2.22×1012 d . p . m .

　　1 milliCurie (mCi) =2.22×109 d . p . m .

　　1 microCurie (m Ci) =2.22×106 d . p . m .

　　1 nanoCurie (nCi) = 2.22×103 d . p . m .

　　1 picoCurie (pCi) =2.22 d . p . m .

　　Curies 和 Becquerels的換算

　　1 Ci = 3.7×1010 Bq =37GBq (gigaBq)

　　1 mCi = 3.7×10 7 Bq =37MBq (megaBq)

　　1 m Ci = 3.7×10 4 Bq =37kBq (kiloBq)

　　1 GBq =2.7×10 -4 Ci =27.027mCi(milliCi)

　　1 MBq =2.7×10 -7 Ci =27.027m Ci(nanoCi)

　　1 kBq =2.7×10-10 Ci =27.027nCi (nanoCi)